赛默飞 7500 实时荧光定量 PCR 系统使用注意事项与解决方案

一、核心使用注意事项与解决方案

1. 设备放置与环境控制

问题： 环境波动导致数据偏差

解决方案：

温湿度稳定 ：放置于恒温（15-30℃）、湿度≤80%的洁净空间，远离空调直吹或窗户。

避震防干扰 ：独立实验台放置，远离离心机、振荡器等振动源。

电源保护 ：配置不间断电源（UPS），防止电压波动中断实验。

2. 耗材与试剂适配性

问题： 耗材不匹配影响光学检测

解决方案：

专用耗材 ：仅使用赛默飞认证的96孔板与光学封膜 ，确保透光率一致性。

试剂验证 ：优先选择兼容性高的预混试剂（如TaqMan®），避免沉淀物堵塞管路。

3. 反应体系设置与污染防控

问题： 交叉污染或体系误差

解决方案：

分区操作 ：严格分隔试剂配制区、样本处理区、扩增分析区。

体系标准化 ：反应体积严格控制在20-50μL，使用校准移液器分装。

防污染措施 ：实验前后用10%次氯酸钠溶液擦拭台面，配套使用UDG酶防残留污染。

4. 校准与维护

问题： 信号漂移或孔间差异

解决方案：

定期校准 ：每月执行ROX染料校正 与光学校准 （使用校准板）。

清洁保养 ：每批次实验后清洁样品槽，季度性专业维护光路系统。

二、7500系统的差异化优势

多色通道支持 ：5色荧光通道，支持多重检测，提升实验效率。

智能软件分析 ：配套Applied Biosystems™软件，自动生成Ct值/熔解曲线。

工业级稳定性 ：热电制冷技术，温控精度±0.1℃，保障重复性。

掌握赛默飞7500实时荧光定量PCR系统的规范操作与维护方案，可显著提升分子实验效率与数据准确性。