赛默飞VeritiPro PCR仪标准操作流程

作为生命科学实验室的核心扩增设备，赛默飞VeritiPro PCR仪凭借±0.25°C孔间温度均一性 与5°C/秒快速变温性能 ，为病原体检测、基因分型、表达分析等研究提供可靠支持。规范化的操作流程是确保实验结果准确性、重复性的关键前提 。

一、 开机准备：环境与耗材合规设置（耗时：<5分钟）

运行环境确认：

设备放置于稳定水平台面 ，散热口预留≥10cm空间 。

环境温度：15–30℃ | 相对湿度：≤80% | 避免强电磁干扰源。

连接稳压不间断电源（UPS） 防止电压波动中断实验。

启动设备：

按下前面板电源键，等待系统自检完成 （约1分钟），触摸屏显示主菜单。

耗材选择与装载：

关键提示： 使用非认证耗材可能导致密封失效、导热不均，影响扩增效率！ 

仅使用赛默飞认证耗材 （如MicroAmp™ 96孔反应板、0.2mL单管）。

确认反应板/管与热循环模块凹槽匹配 （避免翘曲）。

轻柔平放 反应板至模块中心，确保无倾斜。

二、 程序创建与参数设置（耗时：2-3分钟）

新建程序：
主菜单选择 Protocol → Create New → 输入程序名称（如 SARS-CoV-2_Ngene）

设置温度步骤（核心操作）：

退火温度： 根据引物Tm值优化（推荐赛默飞在线工具[Primer Design Tool ]）

延伸时间： 按扩增片段长度计算（1kb=60秒）

热盖温度设置（防蒸发关键）：

96孔板：High （高压模式）

0.2mL单管：Low （低压模式）

进入 Lid Temperature 选项，设置为 105°C （推荐值）。

适用耗材类型：

三、 启动运行与实时监控（扩增中操作）

启动程序：

装载样本后关闭热盖，点击 Start → 确认程序参数 → 再次点击 Start。

系统自动检测热盖压力，屏幕显示 "Run in Progress" 。

运行监控要点：

温度追踪： 实时显示当前模块温度、目标温度及剩余时间。

异常报警： 若出现 "Lid Open" （热盖未关严）、"Over Temp" （超温）告警，立即暂停检查。

避免干扰： 运行期间勿开启热盖 ，防止温度骤变影响扩增。

四、 扩增结束与设备维护（5分钟）

程序结束处理：

屏幕显示 "Run Complete" 并发出提示音。

等待模块降温至<60°C （防止热板烫伤或管盖爆开）。

开启热盖，佩戴防污染手套 取出反应板/管。

设备清洁：

热盖底面（冷却后）

模块表面凹槽

仪器外壳及触摸屏

用70%乙醇浸润的无纺布 擦拭：

禁止使用 漂白剂、丙酮等腐蚀性溶剂！

五、 结果分析与数据管理

产物检测： 按需进行凝胶电泳、荧光定量或其他下游分析。

运行记录导出：

菜单选择 Data → Export Run Log（含温度曲线、时间戳等）

合规建议： 保存记录用于实验溯源（ISO 17025要求）

操作合规性要点速查表